国产乱子伦农村xxxx-国产精品久久久久久久久久妞妞-在线黄色大片-国产性xxxxx-国产精品二-久久综合88熟人妻-亚洲人成色在线观看-免费看av软件-好紧好爽免费午夜视频-中文日韩亚洲欧美制服-亚洲欧美系列-成年奭片免费观看视频天天看-狠狠躁夜夜躁人人爽天天开心婷婷-5a级毛片-亚洲www在线-亚洲精品女人久久久-免费成人黄色片-另类 亚洲 图片 激情 欧美-4438亚洲最大-91超碰人人

您好!歡迎訪問上海起發實驗試劑有限公司網站!
全國服務咨詢熱線:

15921799099

當前位置:首頁 > 技術文章 > mdbioproducts常見實驗室應用程序的故障排除

mdbioproducts常見實驗室應用程序的故障排除

更新時間:2021-06-28      點擊次數:1718

 

 

mdbioproducts常見實驗室應用程序的故障排除

 

一般實驗室技術

洗滌技巧:

多通道移液器或噴瓶  

確保移液器的每個尖頭都正確分配或噴射瓶有足夠的壓力。清空孔中的內容物并用指示的洗滌緩沖液體積填充孔。倒出孔,倒置并在干凈的紙巾上吸干。如插入所示重復此過程。最后一次傾析后,倒置去除任何剩余的洗滌緩沖液,并將其吸干在干凈的紙巾上。不要讓孔靜置,按照插圖中的指示進行下一步。注意:如果在傾析時條帶變得松散,則在清洗和在干凈的水槽中潷析之前對條帶進行編號非常有用。

歧管分配器或自動清洗機

確保有適當的真空供應。檢查所有插管或插腳是否正確分配和抽吸。通過抽吸或傾析清空孔。將每個孔填充到插入物中指示的適當體積。*吸出孔。去除緩沖液后,讓抽吸裝置留在孔中,不要過度抽吸孔。如插入物所示重復此過程,不要讓孔在最后一次抽吸后保持干燥。

移液技術:

確保您使用的移液器已校準,并且移液器吸頭正確且牢固地固定在移液器上。將移液器設置到所需的體積并用樣品或試劑預沖洗。緩慢向上吸取試劑,使移液器緩慢返回向上位置。稍等片刻,讓試劑在吸頭中達到體積平衡。將試劑緩慢分配到第一次停止,然后輕輕分配到第二次停止。將移液器保持在此位置,直到將其從儲液器或孔中取出,以避免將試劑吸回。當您取下移液器時,將吸頭向上拉到容器或孔的一側,以釋放可能在吸頭外側的任何液體。

 

ELISA 故障排除

許多因素會影響 ELISA 的性能。

  • 在開始之前仔細閱讀說明。這將有助于避免不必要的錯誤。
  • 使用良好的實驗室規范和校準設備。
  • 使用干凈的容器和干凈的實驗室空間,并在每種試劑之間更換移液器吸頭。
  • 重復運行所有標準和樣品,因為這將提高準確性。

精度差:

  • 清洗不*:確保儀器工作正常,并且抽吸后孔看起來是干的。
  • 試劑混合不均:確保試劑充分混合。
  • 污染:確保使用干凈的容器并在每種試劑之間更換移液器吸頭。
  • 移液錯誤:使用良好的實驗室技術并確保正確校準移液器。

標準曲線:

  • 標準品制備不當:確保正確配制標準品并遵守稀釋說明。
  • 清洗不*:確保儀器工作正常,并且抽吸后孔看起來是干的。
  • 添加到孔中的體積不等:檢查移液器是否已校準以及移液器吸頭是否正確就位。
  • 確保從凈 OD 中減去空白和 NSB 值。

高背景:

  • 確保正確洗滌板。回顧上面的洗滌技術。
  • 遵守所有孵化時間和溫度。高背景可能是由于孵育時間過長或在高于推薦溫度的情況下孵育造成的。

 漂移

  • 使用前將所有試劑置于室溫。
  • 在運行檢測之前或按照試劑盒說明書中的指示準備試劑。
  • 避免中斷檢測設置。

邊緣效果

  • 在環境條件下孵育板時,請注意溫度變化或通風區域。將印版放在空調或暖氣通風口下可能會導致顏色不均勻。

色彩發展

  • 確保所有試劑以正確的體積和正確的時間添加到檢測中。堅持正確的孵化時間。
  • 除非試劑盒插頁中另有說明,否則在加入終止溶液后立即讀取板。
  • 底物是否正確準備和添加
數據縮減
  • 如需有關生成標準曲線的幫助,

IHC 故障排除

 無染色

問題 可能的解決方案)
一抗和二抗可能不匹配。 建議二抗針對產生一抗的物種(例如,如果一抗是在小鼠中產生的,則使用抗小鼠二抗)。
該抗體可能不適用于以天然(非變性)形式顯示蛋白質的 IHC 程序。 在非變性和變性蛋白質印跡上測試抗體,以確保抗體識別非變性抗原。
二抗未避光保存。 建議避免將二抗暴露在光線下。
沒有足夠的一抗與目標蛋白質結合。 減少抗體稀釋。
在 4°C 下孵育更長時間。
感興趣的蛋白質并不大量存在于組織中。 運行陽性對照。
利用放大步驟可以幫助放大信號。 
使用較低稀釋度的一抗。
目標蛋白是核蛋白,抗體不能穿透細胞核。 為了促進細胞核的滲透,在封閉緩沖液和抗體稀釋緩沖液中加入透化劑。
脫蠟可能不夠 將切片脫蠟時間更長。
使用新鮮制備的二甲苯。
福爾馬林和多聚甲醛等固定劑可能會改變抗體識別的表位。 使用抗原修復方法揭露表位。
修復時間更短。
PBS 緩沖液可能被細菌污染,這些細菌已經破壞了目標蛋白質。 在 PBS 抗體儲存緩沖液中使用防腐劑,如 0.01% 疊氮化物。
使用新鮮的無菌 PBS。

 高背景

問題 可能的解決方案)
非特異性結合的阻斷可能是不夠的。 將切片的封閉潛伏期延長至 30 分鐘,將細胞培養延長至 1 小時。使用封閉劑,例如 10% 正常血清用于切片,1-5% BSA 用于細胞培養。
一抗濃度可能太高。 將抗體滴定至更佳濃度,使用更多稀釋液孵育更長時間。這將提供更慢但更具體的綁定。
二抗可能非特異性結合。 在沒有一抗的情況下運行二級對照。
孵化溫度可能太高。 在 4°C 下孵育組織切片或細胞。
組織未充分洗滌。 在所有步驟之間用 PBS *清洗
內源性過氧化物酶是有活性的。 使用酶抑制劑,如堿性磷酸酶的左旋咪唑 (2 mM) 或過氧化物酶的 H2O2 (0.3% v/v)。
福爾馬林和多聚甲醛等固定劑太強,可能已經改變了抗體識別的表位。 改變抗原修復方法。
減少抗原暴露溶液的孵育時間。
應用了過多的基材。 減少底物孵育時間。
色原與細胞中存在的 PBS 發生反應。 在與底物一起孵育之前,使用 Tris 緩沖液清洗切片。
透化已經損壞了膜并去除了膜蛋白。 從緩沖液中去除通透劑。

 

非特異性染色

問題 可能的解決方案)
一抗或二抗的濃度可能太高。嘗試降低抗體濃度和/或潛伏期。 將信號強度與不表達目標的細胞進行比較。
一抗是針對與染色組織相同的物種產生的(例如在大鼠組織上測試的大鼠一抗)。 當應用二抗時,它會與所有組織結合,因為它也是針對該物種產生的。使用針對與您的組織不同的物種產生的一抗/二抗。
內源性過氧化物酶是有活性的。 使用酶抑制劑,如堿性磷酸酶的左旋咪唑 (2 mM) 或過氧化物酶的 H2O2 (0.3% v/v)。
切片/細胞已變干。 將組織切片和細胞保持在高濕度下,不要讓它們變干。
上海起發實驗試劑有限公司
地址:上海浦東川沙鎮川沙路6619號上海起發實驗試劑有限公司
郵箱:xs1@78bio.com
傳真:021-50724961
關注我們
歡迎您關注我們的微信公眾號了解更多信息:
歡迎您關注我們的微信公眾號
了解更多信息
主站蜘蛛池模板: 国产特黄大片aaaa毛片 | 国产做爰全免费的视频软件 | 美女精品一区 | 免费做a爰片久久毛片a片 | 日韩国产一区 | 国产又爽又黄又湿免费99 | 黑人巨大精品欧美一区二区小视频 | 深夜爽爽动态图无遮无挡 | 欧美aⅴ在线 | 国产91打白嫩光屁屁网站 | 狠狠躁日日躁夜夜躁 | 国产在线视频一区二区董小宛性色 | 国产午夜免费视频 | 玖玖在线精品 | 在线观看的av免费网站 | 亚洲综合一区中 | 97色偷偷色噜噜男人的天堂 | 小sao货水好多真紧h国产 | 一级伦理片 | 久久中文字幕无码一区二区 | 少妇性l交大片毛多 | 电影内射视频免费观看 | 大色av| 国产偷国产偷亚洲清高孕妇 | 91精品国产99久久久久 | 无码国模大尺度视频在线观看 | 人妻少妇不满足中文字幕 | 成人精品在线 | 国产污视频在线观看 | 国产偷抇久久精品a片69麻豆 | 国产日韩欧美另类 | 精久久 | 亚洲人成毛片在线播放 | 免费看网站在线观 | 欧美日韩性生活视频 | 亚洲第一a | 137日本免费肉体摄影 | 13一15学生毛片视频软件 | 少妇激情四射 | 制服 丝袜 亚洲 中文 综合 | 30一40一50老女人毛片 | 大香伊蕉在人线国产最新75 | 欧美精品在欧美一区二区少妇 | 中文字幕精品亚洲字幕资源网 | av小说亚洲 | a毛片在线观看 | 2020亚洲欧美国产日韩 | 无码专区亚洲制服丝袜 | 久插视频 | 久久看视频只这 | 少妇人妻精品一区二区三区 | 观看国产色欲色欲色欲www | 日本美女全裸 | 欧美大片视频在线观看 | 亚洲精品一区二区中文字幕 | 日本护士xxxxhd少妇 | 9191成人精品久久 | 131美女爱做视频免费 | 国产乱码免费卡1卡二卡3 | 国产成人精品午夜福利在线观看 | 国产午夜精华液 | 九九精品无码专区免费 | 久久久99精品成人片中文字幕 | 欧美一区二区视频在线观看 | 97精品伊人久久大香线蕉 | 亚洲乱码日产一区三区 | 久久久久青草线蕉综合超碰 | 中文字幕日韩一区二区不卡 | 久久摸摸碰碰97网站 | 久久久国产精品黄毛片 | 国内精品伊人久久久影视 | 乱中年女人伦av三区 | 国产91在线播放九色 | 久久久久久国产精品 | 欧美成人免费观看 | 亚洲国产综合精品一区 | 谁有毛片网址 | 中国少妇嫖妓bbwbbw | 成年人av网站 | 国产偷国产偷亚洲高清日韩 | h狠狠躁死你h出轨高h | 看黄a大片爽爽影院免费无码 | 神马午夜福利不卡片在线 | 欧美又大又粗午夜剧场免费 | 免费观看一级视频 | 麻豆视传媒官网免费观看 | 北条麻妃一区二区三区中文字幕 | 亚洲国产精品久久久久秋霞不卡 | 全程偷拍露脸中年夫妇 | 精品国产乱码久久久久久1区2区 | 午夜视频精品 | 无码人妻在线一区二区三区免费 | 麻豆视频在线播放 | 日韩欧国产精品一区综合无码 | 特黄一级视频 | 国产成在线观看免费视频 | 色综合a怡红院怡红院 | av资源在线 | 日本少妇激三级做爰在线 |